产品描述
随着分子生物学的发展,核酸编辑、扩增、测序、鉴定等以核酸为中心的技术变得越来越先进和方便,尤其是单细胞RNA测序、数字PCR和转基因技术的出现,使得核酸技术应用越来越广泛,灵敏度也越来越高。
PCR污染是每个实验室都多多少少会遇到的问题。原因在于,PCR是非常灵敏的一项检测,100个拷贝之内的靶序列就足以产生阳性扩增,从而容易出现DNA污染导致的假阳性。
PCR实验室普遍面临的问题困扰:
1)PCR实验造成DNA大量合成,不可避免地给实验室带来核酸污染。由于核酸产物不能自动降解,因此只会不断积聚;
2)由于灵敏度升高,少量污染的DNA或RNA分子也会被检测出来,从而造成实验偏差。
3)核酸污染也给实验人员带来未知的健康风险。
而传统的紫外照射法对祛除DNA污染并不理想,因为它仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大。
要解决问题,首先要辨别PCR污染的来源。设立阴阳性对照,有利于检测反应体系各成分的污染情况。尤其是设立空白对照,即包括PCR的全部组分,而不加模板DNA,这对检测试剂中PCR产物残留污染是非常有益的。
在排除试剂污染的可能性外,更换试剂后,若不久又发现试剂被污染了,则考虑可能为环境污染。环境污染的*主要原因是DNA溶液的溅出和DNA气溶胶造成的实验区域的污染,这尤其在PCR产物扩增区容易出现。移液器枪头和EP管架是也较常见的污染部位。
如果是环境污染,还可对每个区域进行涂抹采样和核酸提取检测,以*终鉴定污染的区域所在。润联公司专门生产有DNA核酸清除剂,99.99%解决核酸片段污染。
对PCR的环境污染,有如下几种治理方法:
1. 用常规消毒液定期在环境中喷雾消毒处理。
2. 稀酸处理法:对可疑器具用1mol/L盐酸擦拭或浸泡,使残余DNA脱嘌呤;其缺点是盐酸对皮肤有一定的腐蚀性。
3. 紫外照射法:紫外波长一般选择254/300nm,照射30分钟至2小时。但需要注意的是,UV照射仅对500bp以上长片段有效,对短片段效果不大。
4. 选用商品化的DNA污染核酸去除剂。我们推荐的是润联公司的诺沃赛德NOVOCIDE清除液。其1分钟即起效,方便快捷,效果显著,可同时去除DNA/RNA和DNA酶类。作用1分钟后,用纸巾擦拭,即可完成对DNA污染的清除。
产品的工作原理:
通过螯合剂中和,氧化分解作用,微量离子带正电,容易与核酸片段中的碱基对结合,从而破坏了碱基对中相邻氮之间的氢键,导致DNA结构的变形,粘合剂足以吸附基础核酸和质粒,达到去除污染的目的,清除剂在作用过程后通风即可,对人体无毒无害。
能够快速有效去除物体表面的DNA、RNA以及DNA酶、RNA酶的污染,确保PCR结果的准确。
诺沃赛德核酸清除剂的特点:
①快速有效,1分钟起效。
②使用方便,使用后用干净纸巾擦干即可。
③成分安全,非碱性,无致癌性。
④性能稳定:室温保存。65℃存放2周,也不影响产品品质。
诺沃赛德核酸清除剂使用方法
1)实验操作台和常用耗材:将NOVOCIDE喷在操作台或耗材表面,反应1分钟后,用干净纸巾擦干即可。
2) 电子设备:用NOVOCIDE湿巾擦拭设备表面,反应1分钟后,用干净纸巾擦干即可。
3)移液枪:按厂家说明书从移液枪上拆下套筒。从套筒上取下密封圈和垫片,向套筒充分喷洒NOVOCIDE,作用1分钟后即可用清水冲洗,晾干,再安装。
NOVOCID核酸清除剂应用范围:
本产品适用于实验仪器设备如移液器、PCR仪、离心机、实验台、试管架、离心管架、电泳槽等,及实验耗材如离心管、枪头、手套等表面核酸酶污染的清除,对于塑料制品、乳胶制品、玻璃制品、不锈钢制品均有效。
润联公司通过验证NOVOCIDE对塑料、玻璃、树脂玻璃、铝等材料上的核酸污染的祛除效果,发现NOVOCIDE对来自所有检测表面的DNA扩增片段,质粒、基因组DNA和RNA污染的去除,是极为有效的,而且起效很快。去除结果还显示,和其他常见的DNA清除剂(如乙醇、异丙醇或洗洁精)比较,NOVOCIDE的清除效果和去除效率都具有显著的优势。
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